開(kāi)云網(wǎng)站 開(kāi)云網(wǎng)址瑞典烏普薩拉大學(xué)Johan Elf 和Michael J. Lawson研究團(tuán)隊(duì)合作研究開(kāi)發(fā)出基于時(shí)間分辨成像的CRISPRi篩選技術(shù)。該研究于2019年11月18日在線發(fā)表于國(guó)際學(xué)術(shù)期刊《自然方法學(xué)》。

　　研究人員展示了如何克服在微流控設(shè)備中經(jīng)過(guò)延時(shí)成像后的菌株文庫(kù)原位基因分型的問(wèn)題。他們通過(guò)監(jiān)測(cè)平均每個(gè)敲低大于500個(gè)細(xì)胞周期的復(fù)制叉的位置，來(lái)確定235種不同的CRISPR干擾敲低如何影響大腸桿菌復(fù)制和分裂周期的協(xié)調(diào)。隨后的原位基因分型使他們能夠?qū)⒚糠N表型分布圖定位到特定的遺傳擾動(dòng)，以確定哪些基因?qū)?xì)胞周期控制很重要。單細(xì)胞時(shí)間分辨實(shí)驗(yàn)使他們能夠確定單細(xì)胞生長(zhǎng)速率，細(xì)胞分裂大小和復(fù)制起始體積的分布。這項(xiàng)研究中介紹的技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)大多數(shù)活細(xì)胞顯微鏡檢法的基因組規(guī)模篩選。

　　據(jù)介紹，由于活細(xì)胞顯微鏡和基因庫(kù)規(guī)模的基因組工程之間的差距，他們將基因型多樣性與生物學(xué)上重要的表型聯(lián)系起來(lái)的能力已受到嚴(yán)重限制。